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第一章绪论1

1.1 酶与酶工程研究概况1

1.1.1 酶与酶工程研究的重要意义1

1.1.2 酶研究的历史与现状3

1.1.3 酶工程简介6

1.2 酶是生物催化剂7

1.2.1 酶在生物体内的功能8

1.2.2 酶在生物体内的分布12

1.1.3 酶的作用特点15

1.3 酶的分类命名25

1.3.1 酶的分类命名原则25

1.3.2 各类酶的主要特点26

1.3.3 各类酶的分类和编号的简单说明32

主要参考文献40

2.1.1 酶蛋白结构41

2.1 酶催化功能的结构基础41

第二章酶的作用原理41

2.1.2 酶的活性部位54

2.2 酶催化作用的方式和机制73

2.2.1 酶的作用方式73

2.2.2 酶催化作用专一性的学说76

2.2.3 酶的催化机理77

2.3 酶活性调节机制83

2.3.1 共价调节83

2.3.2 通过聚合(结合)解离进行的调节87

2.3.3 别构调节91

主要参考文献99

第三章酶的生产100

3.1 酶的发酵生产100

3.1.1 酶的来源100

3.1.2 酶的生产菌102

3.1.3 酶的发酵生产104

3.2 酶的生物合成109

3.2.1 酶基因表达的中心法则110

3.2.2 操纵子模型111

3.3 微生物酶产量的提高115

3.3.1 诱导与阻遏115

3.3.2 诱变育种117

3.3.3 限制性内切酶120

3.3.4 基因工程128

3.4 酶分子的修饰(改造)与模拟134

3.4.1 酶分子的修饰134

3.4.2 酶分子的模拟136

主要参考文献139

第四章酶的分离纯化141

4.1 酶分离纯化前的预处理142

4.1.1 酶的抽提142

4.1.2 细胞破碎143

4.1.3 酶液的浓缩144

4.2 沉淀分离法145

4.2.1 盐析法146

4.2.2 有机溶剂沉淀法147

4.2.3 其他沉淀法151

4.3 层析分离法152

4.3.1 离子交换层析152

4.3.2 凝胶排阻层析156

4.3.3 亲和层析162

4.3.4 高压液相层析164

4.4 电泳分离167

4.4.1 凝胶电泳168

4.4.1 等电聚焦电泳169

4.5 酶的结晶170

4.6 酶的纯度与回收率172

主要参考文献175

第五章 酶作用动力学176

5.1 单底物酶促反应动力学176

5.1.1 Michaelis-Menten快速平衡学说177

5.1.2 Briggs-Haldane 稳态学说178

5.1.3 米氏方程的讨论180

5.1.4 米氏方程的表达形式——作图法求Km、Vm185

5.2 双底物酶促反应动力学188

5.2.1 顺序机制188

5.2.2 乒乓机制190

5.3 各种因素对酶促反应动力学的影响191

5.3.1 pH对酶促反应速度的影响191

5.3.2 温度对酶促反应速度的影响194

5.3.3 抑制剂对酶促反应动力学的影响196

5.3.4 底物与产物对酶反应的抑制201

5.3.5 金属离子的影响202

5.3.5 酶的变性因素202

主要参考文献203

6.1 酶活力测定205

章六章 酶分析法205

6.1.1测定原理206

6.1.2 反应条件206

6.1.3 测定方法209

6.1.4 测定213

6.2 酶法分析215

6.2.1 酶法分析的基本方法215

6.2.2 酶法分析的几个问题216

6.2.3 酶标免疫分析218

6.3 酶电极225

6.3.1 酶电极的结构与原理225

6.3.2 酶电极的制备和性能229

6.3.3 酶电极的应用237

主要参考文献237

第七章酶与细胞的固定化239

7.1 酶应用的重要突破240

7.1.1 固定化酶(细胞)的由来与发展240

7.1.2 固定化酶的定义241

7.2 固定化酶(细胞)的制备方法243

7.2.1 固定化酶的制备243

7.2.1 固定化细胞的制备258

7.3 固定化酶(细胞)的性质260

7.3.1 影响固定化酶(细胞)性质的因素262

7.3.2 固定化酶(细胞)的性质265

7.3.3 评价固定化酶(细胞)的指标269

7.4 固定化对酶促反应动力学的影响271

7.4.1 外扩散限制271

7.4.2 内扩散限制276

7.4.3 外扩散与内扩散的联合作用278

7.5 固定化酶反应器280

7.5.1 各种酶反应器的特点281

7.5.2 固定化酶反应器的选择285

主要参考文献287

8.1.1 酶在食品工业中的应用288

8.1 酶在生产实践中的应用288

第八章酶与固定化酶的应用288

8.1.2 酶在轻化工业中的应用292

8.1.3 酶在氨基酸、有机酸生产方面的应用295

8.1.4 酶在医学方面的应用300

8.2 固定化酶(细胞)的应用303

8.2.1 工业应用303

8.2.2 医疗方面的应用308

8.2.3 诊断、分析方面的应用310

8.2.4 环境保护方面的应用312

8.3 几种工业常用酶313

8.3.1 蛋白酶314

8.3.2 淀粉酶319

8.3.3 纤维素酶325

8.3.4 葡萄糖氧化酶328

8.3.5 青霉素酰化酶330

主要参考文献333

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