《应用酶学》求取 ⇩

1导论1

1.1 酶学研究简史1

1.2 酶作为催化剂的显著特点3

1.2.1 催化能力3

1.2.2 专一性3

1.2.3 调节性5

1.3 辅(助)因子7

1.4 酶的分类和命名8

1.4.1 酶学委员会的分类系统8

1.4.2 酶学委员会推荐的命名法12

1.4.3 同工酶13

1.4.4 多酶体系13

2.1.1 建立一个适当的测活方法15

2.1 导论15

2酶的分离与纯化15

2.1.2 酶源选材要以含酶丰富,取材方便、经济为原则16

2.1.3 酶的提取16

2.1.4 酶的提纯16

2.1.5 酶的纯度检验17

2.2 酶的提取17

2.2.1 生物组织的破碎17

2.2.2 ?提18

2.3 酶的提纯19

2.3.1 调整酶溶解度的方法19

2.3.2 根据酶分子大小、形状不同的方法21

2.3.3 根据酶分子电荷性质的方法25

2.3.4 根据酶分子专一性结合的方法28

2.3.5 其他分离方法34

2.3.6 酶纯化方法的选择35

2.3.7 酶纯度的评价36

2.3.8 纯化过程实例39

3酶活力测定49

3.1 酶活力测定49

3.1.1 初速度49

3.1.2 终止法测定酶活力50

3.1.3 连续法测定酶活力52

3.1.4 酶分析的自动化55

3.1.5 酶活力的定义与表示方法57

3.1.6 酶活性测定实例58

3.2 酶反应速度常数的测定59

3.2.1 酶反应的分析59

3.2.2 流管法61

3.2.3 弛豫时谱法62

3.2.4 恒态前动力学63

4酶作用动力学68

4.1 酶动力学数据68

4.2 单底物酶促反应动力学70

4.2.1 引言70

4.2.2 初速度和底物浓度的关系71

4.2.3 米氏方程中Km、Vm??的测定75

4.2.4 可逆反应的Haldane关系式78

4.3 酶作用于多底物时的动力学78

4.3.1 酶促反应按底物数分类78

4.3.2 多底物反应动力学分类79

4.3.3 Cleland命名和表示法81

4.3.4 双底物反应恒态动力学81

4.3.5 多底物反应机制的鉴别88

4.4 King-Altman法93

5酶的抑制作用101

5.1 引言101

5.2 酶的可逆抑制作用101

5.2.1 竞争性抑制101

5.2.2 反竞争性抑制108

5.2.3 非竞争性抑制109

5.2.4 混合型抑制112

5.2.5 部分抑制114

5.2.6 底物抑制115

5.2.7 产物抑制116

5.2.8 变构抑制117

5.3 酶的不可逆抑制作用117

5.3.1 非专一性的不可逆抑制作用118

5.3.2 专一性的不可逆抑制作用119

6pH值和温度对酶作用的影响127

6.1 在稳态条件下pH值对反应速度的影响127

6.1.1 单底物、单产物只形成一种中间物ES的块平衡系统128

6.1.2 啤酒酵母葡萄糖-6-磷酸脱氢酶的双底物反应135

6.2 温度对酶作用的影响141

6.2.1 温度对反应速度的影响141

6.2.2 求解离基团的ΔH0142

7酶的作用机制144

7.1 概论144

7.1.1 酶促反应过渡态144

7.1.2 基元催化反应145

7.1.3 与酶高效率有关的一些因素151

7.1.4 辅(助)因子在酶促反应中的作用155

7.2.1 动力学研究168

7.2 酶作用机制的实验探测168

7.2.2 捕捉 酶-底物复合物170

7.2.3 X-射线晶体衍射法171

7.2.4 氨基酸侧链的化学修饰172

7.2.5 定点突变178

7.2.6 蛋白水解酶作用(酶的修饰)179

7.3 酶反应机制实例180

7.3.1 丝氨酸蛋白酶180

7.3.2 乳酸脱氢酶193

7.3.3 酪氨酰-tRNA合成酶198

7.3.4 超氧化物歧化酶202

8酶活性的调控208

8.1 通过配体诱导酶构象改变的活性调节208

8.1.1 配体和蛋白质的结合208

8.1.2 变构酶217

8.2 通过酶共价结构改变的活性调节224

8.2.1 共价结构不可逆改变的活性调节224

8.2.2 共价结构可逆改变的活性调节226

9应用酶学229

9.1 固定化酶229

9.1.1 酶的固定化方法229

9.1.2 固定化酶的性质235

9.2 酶在医药上的应用242

9.2.1 药用酶242

9.2.2 诊断用酶265

9.3 酶制剂工业生产及其工业应用269

9.3.1 概述269

9.3.2 酶制剂生产技术272

9.3.3 酶在工业上的应用292