《聚合酶链反应原理及应用》

第一部分基本原理与方法学1

1 PCR的优化技术1

2 基因组DNA的扩增8

3 RNA的扩增14

4 RACE:cDNA末端快速扩增19

5 DNA扩增的变性引物28

6 应用变性引物克隆cDNA32

7 PCR用7-Deaza-2′-脱氧鸟苷三磷酸盐37

8 竞争PCR进行mRNA定量41

9 定量PCR48

10 不对称PCR产生单链DNA53

11 PCR进行克隆57

12 寡聚核苷酸连接测定62

13 非同位标记探针和引物66

14 生物素化dUTP的结合77

15 PCR产物的非同位素检测81

16 耐热DNA聚合酶88

17 减少PCR产物残留的方法94

18 血液、细胞和其它体液标本的制备97

19 石蜡包？组织的标本制备102

20 古代DNA的扩增107

第二部分研究应用112

21 PCR模板的体外转录112

22 重组PCR118

23 DNA酶I足迹122

24 TaqDNA聚合酶测序126

25 用噬菌体启动子直接测序130

26 变性梯度凝胶电泳鉴定DNA多态性136

27 反向PCR扩增旁侧序列145

28 同源重组体的检测151

29 RNA处理：载脂蛋白B158

30 以转录为基础的扩增系统163

31 λgtll基因库的筛选168

第三部分遗传与进化172

32 HLADNA分型172

33 多重PCR诊断杜兴氏肌营养障碍180

34 真菌菌丝体和单个芽胞DNA的分离186

35 甲型血友病的遗传学预测190

36 单个精子或二倍体细胞的单倍型分析199

37 核糖体RNA基因的扩增进行分子进化研究205

38 真菌核蛋白体RNA基因的直接测序和扩增研究种系发生210

第四部分诊断学和法医学217

39 人类T细胞淋巴瘤和白血病病毒的检测217

40 人类免疫缺陷病毒检测228

41 乙型肝炎病毒的检测236

42 人类生殖乳头状瘤病毒的分型和检测241

43 人类巨细胞病毒的检测250

44 肠道病毒的PCR扩增253

45 新病毒257

46 PCR和寡核苷酸杂交分析ras基因点突变262

47 B细胞淋巴瘤：t（14,18）染色体重排266

48 PCR和基因探针检测环境水样中细菌病原体272

49 PCR诊断视网膜母细胞瘤277

50 亲缘关系的鉴定283

第五部分仪器设备和材料291

51 茶杯内PCR291

52 一个低耗价的空气驱动循环炉295

53 组织包埋机改作自动PCR仪301

54 组建一个PCR工作实验室301

55 基本设备和材料310