《表3 海参酶解液潜在DPP-IV抑制肽的序列鉴定》

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《海参二肽基肽酶IV抑制肽的酶解制备及结构鉴定》

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为鉴定海参酶解液中发挥DPP-IV抑制作用的肽段结构，采用UPLC-ESI-Q-TOF-MS/MS对海参酶解物的肽段进行序列解析。前人研究发现，DPP-IV抑制肽在结构组成上存在一定的规律，即通常N末端具有Trp（色氨酸）或第二位置为Pro或Ala[2，3]的结构。通过对海参中酶解产物的肽段进行分析，共筛选出28条具有这种DPP-IV抑制肽典型结构特征的肽段，如表3所示。这些肽的分子量在500～1936之间。DPP-IV抑制肽的原料来源广泛，包括酪蛋白、乳清蛋白、胶原蛋白等多种来源于植物或动物蛋白原料。目前已报道的DPP-IV抑制肽大约共有400多条[21]，通常是由2～13个氨基酸组成的寡肽序列。其中，对来源于海洋鱼类的DPP-IV抑制肽的研究如Huang SL[22]等分离纯化得到金枪鱼中PGVGGPLGPIGPCYG，YAYQWQRPVDRIR和PACGGVYISGRPG具DPP-IV抑制活性，在2 mg/m L浓度时，DPP-IV抑制率分别能达到30.49%±1.34%，39.76%±0.87%，39.76%±1.12%；Neves A C[23]等在三文鱼中鉴定出具DPP-IV抑制活性的肽：GPAV（IC50=245.58±7.151μM），VC（IC50=5413.45±62.151μM），VP（IC50=880.0μM），YP（IC50=658.1μM）和PP(IC50=5860μM）。结果表明，大部分带有脯氨酸和丙氨酸的多肽DPP-IV抑制率较高。对表3鉴定得出的肽采用BIOPEP(http://www.uwm.edu.pl/biochemia/index.php/pl/biopep）检索对比已报道DPP-IV抑制肽，发现鉴定出的具DPP-IV抑制肽特征的肽均没有被报道，其中有一条类似结构的肽APGPAGP的IC50为105.44μM。因此，在后续研究中有待进一步合成这些潜在的DPP-IV抑制肽，验证其活性强弱，从而挖掘出新的强活性DPP-IV抑制肽。