《表2 已鉴定的DPP-IV抑制肽序列的抑制潜能》

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《食源二肽基肽酶Ⅳ抑制剂的研究进展》

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测定分级分离获得的各个组分的DPP-IV抑制活性，选取抑制活性最高的组分进行肽的鉴定。一般采用前端分离技术与质谱联合的方法，如HPLC-质谱（mass spectrometry，MS）、HPLC-串联质谱（tandem mass spectrometry，MS/MS）、基质辅助激光解吸电离飞行时间（matrix-assisted laser desorption ionization time-of-flight，MALDI-TOF)MS、带有电喷雾电离（electrospray ionization，ESI）的四极杆-飞行时间（quadrupole time-of-flight，QTOF)-MS[9，32]。大多数MS对含5个氨基酸以上的肽可进行精确鉴定，但对含2～4个氨基酸的小肽的鉴定却精度不足[10]。要精确测定分离鉴定肽的DPP-IV抑制能力，需要按照肽的氨基酸序列进行人工合成，并利用体外实验评估其生物学特性。表2列举了部分已得到鉴定的肽的DPP-IV抑制潜能。这些DPP-IV抑制肽由2～11个氨基酸组成，值得注意的是，氨基酸位点较多的肽在通过消化道时有被降解的可能[28]。虽然这些DPP-IV抑制肽的DPP-IV抑制能力明显高于未经富集/纯化的水解物，但相比于化学合成的DPP-IV抑制剂明显要差许多，如西他列汀的IC50值仅为0.000 036 mg/mL（约为88 nmol/L)[16]。