《表1 实时荧光定量PCR分析引物》

《表1 实时荧光定量PCR分析引物》   提示:宽带有限、当前游客访问压缩模式
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《水稻单基因系品种IRBL9-W抗瘟初期基因表达谱分析》


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根据水稻基因组注释数据库(http://rice.plantbiology.msu.edu/index.shtml)及表达谱测序数据选取与水稻抗病相关的6个基因,利用Primer Premier5设计特异的实时荧光定量引物(表1),对表达谱测序同一批的处理和对照样品进行基因差异表达的相对定量,每个样本3次生物学重复。20μL反应体系:Power SYBR?Green PCR Master Mix(2×)10μL,10μmol/L正、反向引物各0.5μL,c DNA模板1μL,dd H2O 8μL。反应条件:95℃预变性10 min;94℃10 s,50~60℃(根据引物设定不同Tm值) 10s,72℃30 s,40个循环。采用2-ΔΔCt法计算基因的相对表达量。