《表1 用于实时荧光定量PCR分析的引物序列》
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《氯化汞对大鲵心脏和胰腺CYP2亚家族成员CYP2K1、CYP2F3、CYP2F5和CYP2C19基因表达的影响》
采用实时定量PCR技术检测大鲵不同组织P450基因的相对表达量.根据1.2.2方法提取不同组织RNA并反转录成cDNA后进行实时定量PCR(以TBP基因为内参基因).用于荧光定量PCR的引物序列见表1.反应体系为20μL:GoTaq?qPCR Master Mix 10μL、cDNA模板1μL、Nuclease-free Water 7μL和上下游引物各1μL.反应在CFX96TM Real-Time System实时定量PCR仪(Bio-Rad)中进行,反应条件为:95℃预变性10 min;95℃变性30 s,60℃退火30 s,72℃延伸30 s,共40个循环;最后在60-95℃进行熔解曲线分析.选择表达相对稳定的TATA框结合蛋白基因(TATA-box-binding protein,TBP)作为内参基因,利用2-ΔΔCT方法计算CYP2亚家族基因的相对表达量[16].
图表编号 | XD0081600500 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2019.06.25 |
作者 | 叶婷、刘亚男、王兴香、曹宇、许抗抗、李灿 |
绘制单位 | 贵阳学院生物与环境工程学院贵州省山地珍稀动物与经济昆虫重点实验室、贵阳学院生物与环境工程学院贵州省山地珍稀动物与经济昆虫重点实验室、贵阳学院生物与环境工程学院贵州省山地珍稀动物与经济昆虫重点实验室、贵阳学院生物与环境工程学院贵州省山地珍稀动物与经济昆虫重点实验室、贵阳学院生物与环境工程学院贵州省山地珍稀动物与经济昆虫重点实验室、贵阳学院生物与环境工程学院贵州省山地珍稀动物与经济昆虫重点实验室 |
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