《表1 用于黄颡鱼实时荧光定量PCR分析的引物》
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《氨氮胁迫下饥饿与复投喂对黄颡鱼肝脏中脂质代谢相关酶活性及相关基因表达的影响》
6PGD:6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶6-phosphogluconate dehydrogenase;G6PD:葡萄糖-6-磷酸脱氢酶glucose 6-phosphate dehydrogenase;FAS:脂肪酸合酶fatty acid synthase;SREBP-1:胆固醇调节元件结合蛋白-1 sterol-regulatory element binding protein-1;PPARα:过氧化物酶体增殖物
使用Prime ScriptTMPT Reagent Kit with gDNA Eraser(TaKaRa)逆转录试剂盒进行第1链cDNA的合成,用于实时荧光定量PCR分析。特异性引物利用Primer Premier 5.0软件设计,如表1所示。所用引物均由生工生物工程(上海)股份有限公司合成。实时荧光定量PCR反应体系(20μL)为:10μL GoTaq?qPCR Master mix、2μL cDNA、0.8μL上游引物、0.8μL下游引物和6.4μL无菌水。实时荧光定量PCR(SYBR Premix Ex TaqⅡ,TaKaRa)反应条件为:95°C,5 min;95℃,20 s,40个循环;57℃,25 s;72℃,25 s,所有反应均重复进行3次。以β-肌动蛋白(β-actin)作为对照基因,采用2-ΔΔCt法[33]分析目的基因的mRNA相对表达量。
图表编号 | XD00192865900 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2021.01.01 |
作者 | 刘嘉欣、张木子、黎明、谢雨欣、钱云霞、王日昕 |
绘制单位 | 宁波大学海洋学院、宁波大学海洋学院、宁波大学海洋学院、宁波大学海洋学院、宁波大学海洋学院、宁波大学海洋学院 |
更多格式 | 高清、无水印(增值服务) |