《表1 TaPINs实时荧光定量PCR分析所用引物》
从Wheat Expression Browser(powered by expVIP)[31-32]下载小麦品种中国春在不同时期不同组织的转录组表达数据,用于分析小麦PIN基因的表达模式,采用实时荧光定量PCR对小麦PIN基因的表达进行鉴定。使用Omega biotek公司植物RNA提取试剂盒(R6827)提取开花后30 d的小麦籽粒RNA,并反转录成cDNA。根据小麦PIN基因序列,利用Oligo 7软件设计定量PCR引物(表1),由上海生工生物工程有限公司合成。实时荧光定量PCR反应体系(20μL)包括10μL SYBR?Green Realtime PCR Master Mix、1μL primer#1(10μmol·L-1)、1μL primer#2(10μmol·L-1)、1μL Template DNA和4μL PCR grade water。反应程序为95℃2 min;95℃15 s,54℃30 s(同时收集信号值),40个循环,溶解曲线分析为54℃—95℃。使用β-Actin作为相对定量的内参基因,采用2-ΔΔCt方法进行数据计算,基因的相对表达量使用(平均值±标准差)表示。
图表编号 | XD00180898100 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2020.06.16 |
作者 | 刘培勋、万洪深、郑建敏、罗江陶、蒲宗君 |
绘制单位 | 四川省农业科学院作物研究所、农业农村部西南地区小麦生物学与遗传育种重点实验室、四川省农业科学院作物研究所、农业农村部西南地区小麦生物学与遗传育种重点实验室、四川省农业科学院作物研究所、农业农村部西南地区小麦生物学与遗传育种重点实验室、四川省农业科学院作物研究所、农业农村部西南地区小麦生物学与遗传育种重点实验室、四川省农业科学院作物研究所、农业农村部西南地区小麦生物学与遗传育种重点实验室 |
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