《表1 实时荧光定量PCR所用引物》

《表1 实时荧光定量PCR所用引物》   提示:宽带有限、当前游客访问压缩模式
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《人参质体ATP/ADP转运蛋白基因PgAATP1的克隆及表达分析》


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利用Perl软件从吉林人参14个组织部位转录组数据库中调取Pg AATP1基因在人参14个组织部位中的表达量,并利用EXCEL绘制成图。根据克隆得到的Pg AATP1基因CDS序列及选取的内参GADPH基因序列,设计特异性引物(表1)。利用本实验室保存的人参发状根为材料,在发状根生长的第24天加入100μmol/L茉莉酸甲酯,处理6、12、24、48、96、144、192、240 h后分别取处理组和对照组样品并冻存于-80℃冰箱中。分别提取处理组和对照组的RNA,逆转为c DNA作为模板,利用设计好的特异性引物进行实时荧光定量q PCR,本研究所用仪器为ABI 7500 Real-Time-q PCR系统(Thermo Fisher Scientific),反应体系为模板1μL;SYBR Green master mix 5μL;2.5μmol/L上游引物0.4μL;2.5μmol/L下游引物0.4μL;dd H2O 3.2μL,反应条件为95℃、60 s;95℃、5 s;60℃、60 s;95℃、15 s;第2~3步40次重复。