《表1 本研究中所用实时荧光定量PCR扩增引物》

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《菊酯类药剂对草地贪夜蛾的毒力及对钠离子通道的诱导特性》

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参考草地贪夜蛾钠离子通道cDNA序列（GenBank登录号MN966968），以草地贪夜蛾EF1-α基因mRNA(GenBank登录号KT218669.1）作为内参基因，利用软件Primer Premier 5.0设计特异性引物（表1），采用实时荧光定量PCR技术测定草地贪夜蛾3龄幼虫钠离子通道基因在5种药剂不同诱导时间下的表达规律，以丙酮处理的的草地贪夜蛾cDNA作为空白对照。20μL反应总体系：上下游引物各0.5μL、cDNA模板1.0μL、Mix 10μL，ddH2O补足20μL。反应程序：95℃预变性30 s；95℃变性10 s，60℃退火30 s，40个循环。试验设3次生物学重复。采用2-ΔΔCT法计算钠离子通道基因的相对表达量（Livak&Schmittgen，2001）。