《表1 实时荧光定量PCR扩增引物》

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《BmNPV对家蚕抗氧化酶基因表达及其酶活性的影响》


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以真核翻译起始因子4A基因(家蚕芯片探针ID:sw22934)为内参基因、酚氧化酶原基因Bmsod(NCBI登录号NM_001043619.1)和Bmcat(NCBI登录号NM_001043447.1)为靶标基因。利用Primer Premier 5.0设计引物(表1)。参照FastStart SYBR Green Master试剂盒操作说明进行实时荧光定量PCR检测,扩增程序:95.0℃预变性30 s;95.0℃5 s,60.0℃30 s,进行40个循环;65.0℃5 s(每次加0.5℃,直至95.0℃)。以CFX-96实时荧光定量PCR检测仪记录试验数据,根据2-△△Ct法计算目的基因相对表达量(Livak and Schmittgen,2001)。