《表3 本研究所用荧光定量PCR引物》

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《大肠杆菌rhtA缺失对血红素合成的影响》

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各菌株于37°C、200 r/min培养过夜后以1%体积分数的接种量转接新鲜LB培养基中，培养12 h后，4°C、12 000×g离心5 min收集菌体，用50 mg/mL的溶菌酶37°C破壁10 min。之后按照TaKaRa试剂盒说明书进行总RNA提取，提取的RNA浓度及纯度使用核酸定量仪测定，之后将RNA直接反转录成c DNA用于荧光定量实验。以上述c DNA为模板，荧光定量PCR引物见表3，选择编码3-磷酸甘油醛脱氢酶的基因gapA作为内参基因，采用SYBR?Green I嵌合荧光法，反应体系参照TaKaRa试剂盒说明书。