《表1 荧光定量PCR所用引物》

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《海萝抗氧化酶系与失水响应因子表达模式分析》

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选用Takara PrimeScriptTM RT regent Kit with gDNA Eraser对海萝RNA进行反转录实验，合成cDNA模板。以10×cDNA稀释液为模板，进行荧光定量PCR（qRT-PCR）扩增。qRT-PCR反应操作流程参照SYBR?Premix Ex TaqTM II（Tli RNaseH Plus，Takara）说明书进行。20μL反应体系包括:2μL稀释后cDNA模板，正向反向引物各0.8μL，10μL SYBR?Premix Ex TaqTM（2×），6.4μL ddH2O。使用三步法进行扩增，扩增程序为:95℃30 s变性；95℃5 s，55℃10 s，72℃20 s，共40个循环。循环结束后通过95℃15 s，60℃30 s，95℃15 s绘制溶解曲线。qRT-PCR扩增反应在Takara TP800 Cycler Dice上进行。每个反应设置3次技术重复，使用2–ΔΔCt法计算目的基因相对表达量，应用Excel处理数据并绘图。所用引物见表1。