《表1 荧光定量PCR所用引物序列》

《表1 荧光定量PCR所用引物序列》   提示:宽带有限、当前游客访问压缩模式
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《不同城市PM_(2.5)对易感小鼠线粒体损伤的影响》


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取20~25mg小鼠心脏组织,用Trizol提取总RNA,甲醛变性琼脂糖凝胶电泳检测RNA完整性,确保OD260/280处于1.8~2.0的范围内.取1μg总RNA,用反转录试剂盒合成c DNA,将其冻存于-80℃使用荧光定量PCR仪进行PCR反应,所需引物均采用Primer Premier 5.0软件进行设计,所用的引物序列见表1.PCR的反应体积为20μL,其中含有10μL SYBR Premix Ex Taq、7μL ddH2O、1μL cDNA和上下游引物各1μL.反应的条件为:95℃3min,95℃20s,55℃20s,72℃20s,扩增45个循环.所有PCR扩增片段的大小均经过溴化乙啶染色的琼脂糖凝胶电泳证实,最终结果以目的基因与内参基因gapdh表达的比值表示.