《表1 16p11.2(hg19)微缺失区域实时荧光定量PCR检测所用引物序列》

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《3例16p11.2微缺失综合征胎儿的产前诊断及其产前超声分析》

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根据3个16p11.2微缺失病例DNA缺失区域，选择共有缺失序列区域为扩增子，设计正反向引物，选择ALB基因为内参，作为靶标拷贝数相对定量的依据；所有引物设计及序列特异性比对均使用Primer 5.0 and National Center for Biotechnology Information Basic Local Alignment Search Tool software(blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgi）。该验证靶标及内参引物序列见表1，扩增体系使用ABI SYBR Green PCR Master Mix，样本均使用TE稀释成5 ng/μl，加样时取2μl作模板；使用ABI 7500荧光定量PCR仪，选择SYBR Green Reagent模式。扩增条件：95℃预变性5 min及热启动酶激活，95℃变性15 s、60℃退火40 s，45个循环。每个样品检测3个复孔，实验进行3次重复。