《表1 用于实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)的引物序列》
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《全氟辛基碘烷的毒性效应及对长链非编码RNA MALAT-1的调节作用》
对暴露后的细胞和斑马鱼胚胎进行实时荧光定量PCR测定,细胞总RNA用Trizol试剂(Invitrogen公司,美国)提取,用Thermo nanodrop 2000核酸测定仪(Thermo Fisher公司,美国)测定所提取的总RNA浓度,A260/A280的比值在1.8~2.0之间。使用i ScriptTMc DNA合成试剂盒(Bio-Rad Laboratories,Inc.,美国)按照说明书进行c DNA的合成。由生工生物工程(上海)股份有限公司合成引物,并且使用SYBR Green Supermix试剂盒进行实时定量PCR,正向和反向引物序列如表1所示。每个反应3个重复样品。使用2-ΔΔCT方法[29]计算相对表达水平的倍数变化。在离体细胞水平上,以GAP-DH的表达量进行标准化来分析MALAT-1的表达水平。在活体模式生物斑马鱼体胚胎体内,以β-肌动蛋白(β-actin)的表达量进行标准化来分析MAL-AT-1的表达水平。
图表编号 | XD00195660100 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2020.08.01 |
作者 | 杨雪、宋飞、彭蕾、户业丽、程波、丁强 |
绘制单位 | 武汉工程大学环境生态与生物工程学院、武汉工程大学环境生态与生物工程学院、武汉工程大学环境生态与生物工程学院、武汉工程大学环境生态与生物工程学院、武汉工程大学环境生态与生物工程学院、宜昌三峡制药有限公司 |
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