《表1 实时荧光定量聚合酶链反应目的基因的引物序列》

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《鸢尾素对大鼠骨髓间充质干细胞Sost基因表达及成骨分化的影响》

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按上述实验分组在6孔板中进行细胞培养，在培养第3、10天，提取各组细胞总RNA，以2μg反转20μL体系进行逆转录，反应条件为:42℃，15 min（循环3次），85℃，5 s。采用反转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测成骨相关mRNA水平检测，包括ALP、BMP2、Sost、Lrp5，引物序列见表1。PCR扩增反应条件:预变性:95℃，5 s；PCR反应:95℃，5 s；55℃，30 s，72℃，30 s；共40个循环；溶解曲线分析:95℃，5 s。2-△△Ct计算实验组的目的基因经内参（GAPDH）校正后相对于对照组的相对表达量。