《表1 实时聚合酶链反应引物序列表》

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《间歇性循环张力对人间充质干细胞成软骨分化的影响》


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吸去六孔板中的培养液,用PBS洗两次,每孔加入1 m L Trizol冰上裂解20 min提取RNA,用Nano-Drop 2000测定RNA浓度并达到实验要求纯度,按20μL反转录体系反转成cDNA后进行RT-PCR,每个样品均设3个副孔。反应条件:95℃预变性30 s;95℃变性5 s;60℃退火延伸25 s,扩增50个循环。PCR反应引物如表1,GAPDH为内参。使用Roche LightCycler480软件分析结果,计算2-△△Ct值。