《表1 实时定量聚合酶链反应引物序列》

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《上调miR-27a对胃癌干细胞干性特征的影响》

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分别收集实验组和对照组成球细胞各1×106个细胞用于提取总RNA，按照Trizol Reagent试剂盒说明书进行。分光光度计检测RNA浓度，取1μg RNA按照逆转录试剂盒进行合成cDNA，PCR反应体系为50μL，包括25μL混合物，上、下游引物各1μL（分别为Oct-4、Sox2、GAPDH），2μL cDNA模板，双蒸水补足到50μL。95℃预变性10 min，95℃变性10 s，60℃退火30 s，72℃延伸30 s，扩增40个循环。荧光定量PCR（7500）检测各基因的表达，引物序列见表1，操作步骤及加样剂量按照荧光定量PCR试剂盒说明书进行，结果用7500System Software V 2.0分析，以GAPDH基因为内参，根据公式2-ΔΔCT计算目的基因的相对表达量。