《表1 实时定量聚合酶反应引物序列》

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《甲基化结合蛋白2和组蛋白去乙酰化酶6在人瘢痕组织中的表达》

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（1）总RNA提取:将组织从-80℃冻库取出，加入液氮进行研磨后加入总RNA提取试剂TRIzol，匀浆；向每个EP管中加入0.2 ml氯仿，混合至乳化；12 000 g，4℃，离心15 min；小心将上清液转移至新的无酶离心管中，分别加入1 ml异丙醇，混匀，静置10 min；12 000 g，4℃，离心10 min；移去上清液，加入1 ml 75%乙醇，洗涤管壁；12 000 g，4℃，离心5 min；干燥沉淀，加入50μl DEPC水，溶解沉淀。（2）逆转录:分光光度计测总RNA浓度，按照Protocol加样，反应流程如下:42℃14 min，85℃2 min；反应完成后立即取出EP管，置于冰上冷却。cDNA扩增:分光光度计测定cDNA浓度；按照Protocol加样，上样过程中每个样品设置3个复孔，均设立阴性对照；设置反应参数:50℃2 min，95℃10 min，95℃15 s，60℃1min，Reps:40；95℃15 s，60℃1min，95℃15 s；Reps:1；总反应时间:2 h 8 min。利用每个样品所得CT值进行数据分析，求出相应的△CT及2（-△CT）值。用于qRT-PCR的引物序列如下见表1。