《表1 实时荧光定量PCR的引物序列》

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《纯钛表面TiO_2纳米管结合Ⅰ型胶原促进成骨细胞黏附和骨结合》

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实时荧光定量PCR分析基因表达:培养1，3，5，7 d后，采用Trizol法提取细胞总RNA，反转录为c DNA，使用SYBR Premix Ex TaqII试剂通过7500 Fast实时荧光定量PCR仪分析黏附斑蛋白和护骨素和管家基因（GAPDH）的表达。目的基因和管家基因的基因银行编码、上下游引物序列和扩增的PCR扩增产物长度，见表1。目的基因的mRNA表达值均通过管家基因GAPDH进行标准化处理后进行比较。PCR反应条件:95℃预变性30 s，95℃变性5 s，60℃退火30 s，运行40个循环。采用2-??Ct值法计算基因表达倍数变化。