《表1 实时荧光定量PCR引物序列》

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《异甘草素对小儿血管瘤内皮细胞生物学特性及PI3K/AKT信号通路的影响》

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F:上游引物；R:下游引物

采用实时荧光定量PCR法。收集培养72 h后的各组细胞，采用Trizol法提取总RNA。用反转录试剂盒以总RNA为模板合成cDNA。配制含有2μL cDNA、8.5μL ddH2O、12.5μL SYBP Premix Ex Taq和各1μL上下游引物的反应体系，反应条件:95℃预变性60 s；95℃变性15 s，52～62℃退火20s，72℃延伸70 s，共40个循环。采用2-ΔΔCt法计算目的基因mRNA的相对表达量。其中，由上海生工生物工程股份有限公司合成的各引物序列见表1。