《表1 实时荧光定量PCR引物序列》
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《白细胞介素-27在顺铂所致急性肾损伤中的高表达及对细胞凋亡的抑制作用》
TRIzol(15596-026,Thermo Fisher Scientific,美国)法提取小鼠肾脏及HK-2细胞总RNA。应用反转录试剂盒(RR036A,TaKaRa,日本)将RNA反转录为c DNA,反应体系总体积10μL,反应条件为35℃15 min,85℃5 s。采用实时荧光定量PCR试剂盒(RR820A,Ta KaRa,日本)在394孔板上进行实时荧光定量PCR。总反应体系包括2×SYBR溶液5μL,ROX referenceⅡ染料0.2μL,上、下游引物各0.2μL,cDNA 1μL,高温高压处理的双蒸水3.4μL,总计10μL。实时荧光定量PCR反应条件为95℃预变性30 s;95℃、5 s,60℃、30 s,40个循环。每个样本独立检验,并重复3个复孔。以β-actin为内参,用ΔΔCt法分析数据。于PrimerBank网站检索获取引物序列后由上海博尚公司合成。引物序列见表1。
图表编号 | XD0040291500 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2019.04.28 |
作者 | 周培慧、王丽 |
绘制单位 | 上海交通大学医学院附属第九人民医院肾内科、上海交通大学医学院附属第九人民医院肾内科 |
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