《表1 实时荧光定量PCR引物序列》

《表1 实时荧光定量PCR引物序列》   提示:宽带有限、当前游客访问压缩模式
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《白花蛇舌草通过抑制RAP1-JNK信号通路选择性促进人肾癌ACHN细胞间质-上皮转化》


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细胞处理及分组同1.4节。收集细胞,用TRIzol裂解细胞后提取细胞总RNA。随后用反转录试剂盒(PrimeScript RT Reagent Kit With gDNA Eraser)将RNA反转录为cDNA,以此cDNA模板用实时荧光定量PCR试剂盒(TB Green Premix Ex Taq)进一步行PCR扩增,检测各组细胞中细胞周期蛋白A2(cyclin A2)、细胞周期蛋白B1(cyclin B1)、cyclin B2、Bcl-2相互作用细胞死亡介导因子(Bcl-2 interacting mediator of cell death,BIM)、caspase 10、p53正向细胞凋亡调控因子(p53 upregulated modulator of apoptosis,PUMA)、Bcl-2及Bcl-XL mRNA的表达水平,实验流程参阅试剂盒操作说明,引物序列见表1。PCR反应条件为95℃30 s,95℃5 s、60℃30 s,共40个循环。以2-ΔΔCt值表示各目的基因的相对表达水平。