《表1 实时荧光定量PCR引物序列》

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《仔猪断奶后1周内血清生化指标、十二指肠形态结构及空肠中钠/葡萄糖共转运载体1与二肽转运载体1基因表达量的变化》

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每头仔猪取100 mg空肠样品在液氮中充分研磨，收集于1.5 mL的EP管中，用RNA提取试剂盒（SK1312，上海生工）提取总RNA，用cDNA试剂盒（SK2445，上海生工）以提取的总RNA为模板进行RT反应，然后立即进行实时荧光定量PCR反应。SG LT1、PepT1基因和内参基因β-肌动蛋白（β-actin）引物均由上海生工设计并合成，引物序列见表1。反应体系如下:cDNA 2μL，SYBR Green Real time PCR M aster M ix 10μL，上游、下游引物各1μL，0.1%DEPC处理水6μL。实时荧光定量PCR反应程序如下:95℃3 min，然后95℃30 s进行40个循环，最后70℃延伸5 min。分别测定目的基因和内参基因的Ct值，用2-ΔΔCt方法计算各基因表达量。