《表1 实时荧光定量PCR引物序列》

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《环状RNA circ＿0002052在骨肉瘤组织中的表达及临床意义》

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根据反转录试剂盒说明书将RNA反转录为cDNA。采用实时荧光定量PCR法检测circ＿0002052表达，引物由上海生工生物工程有限公司合成。PCR反应体系为25μL:1×SYBR master-mix 10μL，上、下游引物各1μL，模板DNA 5μL，ddH2O 8μL。反应条件:95℃2min；95℃15s，60℃1min，72℃15s；45个循环，72℃10 min。使用2-ΔΔCt法计算circ＿0002052相对表达量。依据骨肉瘤组织circ＿0002052相对表达量中位数（0.46），将骨肉瘤患者分为高表达组23例和低表达组23例。PCR引物序列见表1。