《表1 荧光实时定量PCR引物》

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《A-2巨球蛋白对骨关节炎软骨细胞的作用》

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软骨细胞培养24 h后，冰上裂解细胞，提取总RNA，使用iScript cDNA合成试剂盒（Bio-Rad公司）将mRNA反转录合成cDNA，使用SYBR Green试剂盒（Bio-Rad公司）进行扩增，内参为18SRNA，引物序列见表1。扩增条件为50℃预孵育2min，95℃酶激活10 min，之后扩增40个循环，95℃变性10 s，55℃退火30 s，72℃延伸30 s。