《表1 实时荧光定量PCR引物》

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《牦牛Linc24063的克隆鉴定及其与miRNAs表达水平的相关性分析》

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F:上游引物；R:下游引物；RT:miRNA反转录引物；RT和F引物序列中小写字母分别为茎环结构序列和相应的miRNA序列，以保证扩增的特异性

利用Prime Script TM RT reagent Kit with g DNA Eraser (TaKaRa，大连）试剂盒将各组织总RNA反转录为c DNA，Linc24063表达量的检测参照SYBR Premix Ex TaqTM试剂盒（Takara）说明书，内参基因选择核糖体蛋白S9 (RPS9，登录号：XM＿005899362.2）、广泛表达蛋白（UXT，登录号：XM＿014483477.1）[20]；对于mi RNA表达量的检测利用Stem-loop方法[21]，内参基因选择5S rRNA。利用Bio-Rad CFX96（伯乐，美国）定量仪进行牦牛Linc24063及miRNAs组织表达谱分析。扩增体系均为：2×SYBR?Premix Ex TaqTMⅡ10μL，cDNA模板1μL，上下游引物各1μL，ddH2O 7μL。qPCR条件为：95℃30 s；95℃5 s，60℃30 s，39个循环。所用引物列于表1。