《表1 实时荧光定量PCR引物》

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《陆地棉扩展蛋白基因的鉴定与特征分析》

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于陆地棉材料N874系的花铃期，取-3、-1、0、3、5、10和15 DPA(days post-anthesis）的棉铃分离出胚珠，取5、10、15和20 DPA的棉铃分离出纤维。利用总RNA提取试剂盒（天根，北京）从棉花胚珠和纤维中提取RNA，用Nano Drop 2000和1%的琼脂糖凝胶电泳检测RNA的含量和质量。以RNA为模板反转录合成c DNA。q RT-PCR引物下载于西南大学（http://biodb.swu.edu.cn/qprimerdb），采用UBQ7(AF024716）作为内参基因（表1）。用Applied Biosystems Quant Studio 7 Flex实时PCR系统（Applied Biosystems，USA）进行q RT-PCR。反应程序：94℃3min；94℃45 s，52℃45 s，72℃45 s，40个循环。每个q RT-PCR样品设置3个重复。使用2-△△CT法计算相对表达量。