《表1 团头鲂mc3r基因克隆及荧光定量PCR所用引物》

  提示：宽带有限、当前游客访问压缩模式

本系列图表出处文件名：随高清版一同展现

《团头鲂黑素皮质素3型受体基因克隆及表达分析》

1. 获取 高清版本忘记账户？点击这里登录

1. 下载图表忘记账户？点击这里登录

根据团头鲂转录组中已获得的mc3r基因序列片段，设计引物（表1）结合RACE试剂盒（Invitrogen）和SMARTerTM RACE cDNA AmplificationKit试剂盒（Clontech）扩增5′端和3′端序列。RACE-PCR产物经电泳后对目的条带进行切胶回收纯化，与pMD18T进行连接，转化后对阳性克隆进行测序，最后通过拼接获得完整的cDNA序列。应用DNAMAN 6.0对团头鲂MC3R氨基酸序列进行分析比对。其磷酸化位点通过Netphos 3.1（http://www.cbs.dtu.dk/services/NetPhos-3.1/）和NetNG Lyc 1.0（http://www.cbs.dtu.dk/services/NetNGlyc/）进行预测。团头鲂MC3R结构域通过疏水性检测（http://web.expasy.org/cgi-bin/protscale/protscale.pl）、跨膜结构域预测（TMHMM Server V.2.0，http://www.cbs.dtu.dk/services/TMHMM2.0/）进行分析。采用MEGA6.0软件中的Neighbor Joining方法构建团头鲂MC3R序列系统发育树1000次自举（Bootstrap）检验计算各节点支持率。