《表1 文蛤CDK1基因克隆及荧光定量所用引物》

《表1 文蛤CDK1基因克隆及荧光定量所用引物》   提示:宽带有限、当前游客访问压缩模式
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《文蛤CDK1基因在选育与自然群体早期生长阶段中的表达特征》


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采用RACE技术克隆获得MmCDK1基因cDNA序列全长。使用RNA提取试剂盒(天根)提取文蛤性腺总RNA,使用Clontech RACE试剂盒合成cDNA第一条链。在本实验室构建的文蛤转录组文库中获得MmCDK1 EST序列,在已知的中间片段上设计3′RACE和5′RACE特异性引物(表1),PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳检测并切胶回收,将纯化产物与pMD18-T载体进行连接并导入DH5α大肠杆菌感受态细胞,37℃过夜培养,经阳性克隆筛选后,将含有目的基因片段的菌液送至上海生工生物工程有限公司测序。