《表1 基因克隆和定量PCR所用引物》
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《苹果MdCYP707A家族基因表达分析和MdCYP707A1的功能鉴定》
RNA的提取参照RNA plant plus Reagent试剂盒(天根),用反转录试剂盒PrimeScriptTM RT reagent Kit with gDNA Eraser(Perfect Real Time,TaKaRa)进行反转录,所得的cDNA用于后续的荧光定量PCR的模板。以18S RNA为内参基因,其正向引物为5′-ACACGGGGAGGTAGTGACAA-3′,反向引物为5′-CCTCCAATGGATCCTCGTTA-3′,qRT-PCR所用的荧光染料为UltraSYBR Mixture (with ROX),反应体系中各反应物的量如下:2×UltraSYBR Mixture 10.0μL,上游引物(10mmol·L-1)1.0μL,下游引物(10μmol·L-1) 1.0μL,cDNA 1.0μL,ddH2O 7.0μL,共20μL。每个模板3次生物学重复。荧光定量PCR反应条件:95℃预变性10 min,95℃变性15 s,56℃退火15 s,65℃延伸10 s,40次循环。最后采用2–??CT法进行定量数据分析。PCR所用引物在表1中列出。
图表编号 | XD0081727600 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2019.08.25 |
作者 | 张婷婷、康慧、付璐璐、由春香、王小非、郝玉金 |
绘制单位 | 作物生物学国家重点实验室山东果蔬优质高效生产协同创新中心山东农业大学园艺科学与工程学院、作物生物学国家重点实验室山东果蔬优质高效生产协同创新中心山东农业大学园艺科学与工程学院、作物生物学国家重点实验室山东果蔬优质高效生产协同创新中心山东农业大学园艺科学与工程学院、作物生物学国家重点实验室山东果蔬优质高效生产协同创新中心山东农业大学园艺科学与工程学院、作物生物学国家重点实验室山东果蔬优质高效生产协同创新中心山东农业大学园艺科学与工程学院、作物生物学国家重点实验室山东果蔬优质高效生产协同创新中心山东农业大学园 |
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