《表1 VH、VL和scFv基因PCR扩增、克隆所用的引物序列》

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《不同杂交瘤细胞株单链抗体的构建及性质比较》

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a：横线的为NcoⅠ酶切位点；b：横线的为linker序列；c：横线的为linker序列；d：横线的为XhoⅠ酶切位点，双线的为histag序列。

分别以已经获得的c DNA为模板，以VH-FOR、VH-Back、VL-FOR和VL-Back为引物[23-24]，PCR扩增VH和VL基因，见表1。将获得的VH和VL基因片段分别连接到载体pMD19-T上，将获得的重组载体pMD19-T-VH和pMD19-T-VL转化到E.coli Trans5a细胞中，以便基因测序。