《表1 基因克隆和定量PCR所用引物》

《表1 基因克隆和定量PCR所用引物》   提示:宽带有限、当前游客访问压缩模式
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《MdCYP707A1异位表达拟南芥参与非生物胁迫和ABA应答》


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RNA的提取采用试剂盒法,所用试剂盒为RNA plant plus Reagent试剂盒(天根),反转录试剂盒为PrimeScript TM RT reagent Kit with g DNA Eraser(Perfect Real Time,Ta KaRa),反转录后的cDNA为荧光定量的模板。荧光定量PCR以18S RNA为内参基因,UltraSYBR Mixture(with ROX)为荧光定量的染料,PCR所用的反应体系如下:2×UltraSYBR Mixture 10.0μL,上游引物(10 mmol·L-1)1.0μL,下游引物(10μmol·L-1)1.0μL,cDNA 1.0μL,ddH2O 7.0μL,共20μL。每个模板3次生物学重复。荧光定量PCR反应条件:95℃预变性10 min,95℃变性15 s,56℃退火15 s,65℃延伸10 s,40次循环。最后采用2–??CT法进行定量数据分析。PCR所用引物在表1中列出。