《表1 基因克隆和实时荧光定量所用引物序列》

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《苹果乙烯响应因子MdERF1B-like的克隆与功能鉴定》

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利用天根生化科技有限公司的多糖多酚植物总RNA提取试剂盒提取苹果果皮和愈伤组织RNA。cDNA的合成采用全式金生物技术有限公司生产的TransScript One-Step gDNA Removal and cDNA Synthesis SuperMix。使用SYBR?Green PCR Master Mix（天根）进行MdERFs、MdMYB9、MdCHS、MdF3H、MdDFR、MdANS、MdUFGT等的实时荧光定量分析，MdActin作为内参基因，PCR反应体系为Tip qMix 10.0μL，上、下游引物各1.0μL，cDNA 1.0μL，ddH2O 7.0μL。PCR反应程序为95℃预变性30 s，95℃变性15 s，58℃退火15 s，72℃延伸10 s，40个循环，使用2-ΔΔCT方法（Livak&Schmittgen，2001）分析定量数据。所用荧光定量引物见表1。对照组非着色的表达量设为1。