《表1 草莓FaTT10基因克隆及荧光定量所用引物》

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《草莓FaTT10基因的克隆与表达分析》


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根据克隆得到的草莓FaTT10核酸序列,设计荧光定量引物FaTT10-1F和FaTT10-1R,并以FaACTIN-1F和FaACTIN-1R%(表1)为荧光定量的内参引物。采用Bio-Rad CFX96荧光定量PCR仪(Bio-Rad,美国)检测草莓不同组织和各发育时期果实的FaTT10转录水平。荧光定量PCR体系为:SYBR Green荧光染料10μL,上下游引物各0.8μL,稀释10倍的c D-NA1.5μL,用已灭菌的ddH2O补足至20μL。扩增程序为95℃3 min;95℃10 s,55℃30 s,72℃15 s,40个循环。以不加模板cDNA为阴性对照,3孔重复,采用2-△△Ct法计算相对表达量。