《表2 克隆关键基因荧光定量PCR引物》

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《水曲柳FmPHV基因克隆及在形成层愈伤组织中的表达分析》

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以水曲柳微管蛋白基因Tu作为内参基因（Livak et al.，2001），引物见表2。PCR反应体系如下:10μL Master Mix，2μL模板cDNA，10μmol·L-1的正反向引物各1μL，用ddH2O补足至20μL。扩增反应利用Applied Biosystems7500荧光定量PCR仪进行，反应程序:95℃30 s、95℃5 s、60℃34 s（共40个循环）、95℃15 s、60℃1 min、95℃15 s。每份样品进行3次重复。目标基因表达水平运用相对定量的2-ΔΔCt（Livak et al.，2001）进行计算，式中:Ct是热循环仪检测到反应体系中荧光信号的强度值。