《表1 引物序列：8个茶树WRKY转录因子基因的克隆与表达分析》

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《8个茶树WRKY转录因子基因的克隆与表达分析》

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在已公布的茶树基因组数据库中，根据序列注释的信息筛选出相关的WRKY编码序列，通过BLASTn与其他植物中报道的WRKY转录因子比对得到更为详细的注释，获得8个包含完整开放阅读框（ORF）的cDNA序列。为进一步验证序列准确性，参照王鹏杰等[22]的方法进行克隆验证。在ORF两端设计RT-PCR引物（表1），以铁观音芽叶cDNA为模板进行PCR扩增，反应程序为95℃、30 s；56℃、30 s；72℃、2 min，35个循环，PCR产物经1%琼脂糖凝胶电泳检测后进行回收纯化、连接、转化、测序，验证得到8个茶树WRKY基因包含完整ORF的cDNA序列。