《表2 引物序列：柑橘R2R3-MYB类转录因子CitMYB20的克隆与表达分析》

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《柑橘R2R3-MYB类转录因子CitMYB20的克隆与表达分析》

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注:下划线标注的是酶切位点

根据CitMYB20序列设计不含终止子的引物，其上游引物加上KpnⅠ酶切位点和保护碱基，下游引物加上SmaⅠ酶切位点和保护碱基（表2）。以晚锦橙cDNA为模板进行PCR扩增后，将该基因插入pLGN-mGFP载体中构建p LGN-CitMYB20-mGFP质粒，pLGN-mGFP质粒作为对照。将pLGN-CitMYB20-mGFP和pLGN-mGFP通过根癌农杆菌转化法转化洋葱表皮细胞，28℃暗箱培养72 h（Xu et al.，2014）。选取转化的洋葱表皮制作成装片，在Olympus荧光显微镜的明视野和暗视野下观察该基因的表达情况，并拍照记录保存。