《表1 引物及其序列：苦荞转录因子基因FtMYB56的克隆及其对黄酮合成的调控》

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《苦荞转录因子基因FtMYB56的克隆及其对黄酮合成的调控》

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按照天恩泽基因公司“植物RNAout试剂盒”的操作说明进行苦荞总RNA的提取，再按照Ta Ka Ra公司逆转录试剂盒Prime Script TM-RT rengent Kit with g DNA Eraser （Perfect Realtime）的操作说明反转录获得c DNA第一链，将其保存于-20℃冰箱。从苦荞花期转录组数据中筛选出一条可能参与黄酮类化合物代谢的基因序列Ft MYB56，设计一对引物以c DNA第一链为模板进行PCR扩增（表1）。反应参数为98℃2 min，30×（98℃30 s，60℃30 s，72℃30 s），72℃5 min，20℃。PCR产物用1.5%的琼脂糖凝胶电泳检测，经T载体克隆后送成都擎科生物技术公司进行序列测定。