《表2 目的基因引物序列：运动对肥胖大鼠骨骼肌FGF21及其调控因子的影响》

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《运动对肥胖大鼠骨骼肌FGF21及其调控因子的影响》

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将冻存的腓肠肌组织剪碎放入玻璃匀浆器中，加入TRIzol试剂进行组织匀浆，按说明书步骤提取组织总RNA。以提取出的RNA为模板，配制20μL的反转录反应体系合成cDNA。然后，再以cDNA为模板，β-actin为内参，配制50μL的荧光定量PCR反应体系进行基因扩增，扩增条件为：94℃4分钟、94℃20秒、60℃25秒、72℃30秒，共循环35次。利用荧光定量PCR仪（CFX 96 Conect，Bio-Rad，USA）进行荧光检测，再通过2-△△ct公式计算样本中FGF21、PI3K、Akt的mRNA相对含量。实验中所需的引物均由上海生工生物技术有限公司按照GeneBank数据库提供的基因序列（表2）合成。