《表1 引物序列：Sox6基因调控鸡骨骼肌分化和肌纤维类型的研究》

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《Sox6基因调控鸡骨骼肌分化和肌纤维类型的研究》

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注:下划线为保护碱基和酶切位点。

根据NCBI上的基因数据库下载得到Sox6基因的CDS序列，利用Oligo 7（Molecular Biology Insights，USA）设计，送至广州天一辉远生物科技有限公司合成（引物序列如表1所示），利用原代成肌细胞反转录得来的cDNA为模板，KOD FX酶（TOYOBO，Japan）进行PCR扩增，运用HiPure PCR Pure Mini Kit（购自Magen公司 （广州）） 进行胶回收，KpnⅠ内切酶、Eco RⅠ内切酶（购自NEB公司 （北京）） 对回收片段以及pcDNA3.1空质粒进行双酶切，用T4 DNA Ligase（购自TaKaRa公司）16℃进行过夜酶连。连接产物转化到DH5α感受态细胞（购自围谷生物科技有限公司 （广州）） ，经过氨苄抗生素培养板培养筛选出单克隆菌，送广州生工生物工程股份有限公司进行测序，测序结果经NCBI网站以及DNAStar公司（USA）的Seqman软件比对确认正确后，菌液扩繁，用HiPure Plasmid EF Mini Kit无内毒素抽提试剂盒（购自Magen公司）进行质粒抽提，置于-20℃待用。