《表1 引物序列:过表达FGD6对肝干细胞分化的调控作用》
收集腺病毒感染48 h后的HP14.5细胞,用Trizol法提取细胞总RNA,紫外分光光度计检测其纯度及浓度。将质量合格RNA样品安装宝日医生物技术(北京)有限公司的逆录试剂说明书合成cDNA。以c DNA为模板,由特定引物(表1)扩增出对应的产物。其中,PCR反应体系:12.5μL PremixTaq酶、1μL上游引物(10μmol/L)、1μL下游引物(10μmol/L)、lμL c DNA模板、9.5μL去离子水,总体积为25μL。循环条件:94°C预变性4 min;94°C变性30 s,58°C退火30 s(退火温度据不同引物而定),72°C延伸45 s,变性、退火及延伸过程在30个循环后于72°C延伸3 min。取PCR产物5μL上样,5μL DNA分子量标准物作参照。使用1.3%琼脂糖进行电泳,于紫外投射仪下拍照,其图片用于结果分析。
图表编号 | XD008836200 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2019.10.01 |
作者 | 余师师、沙鸥、李宛玲、胡倩、何通川、张秉强 |
绘制单位 | 重庆医科大学附属第一医院消化内科、重庆医科大学附属第一医院消化内科、重庆医科大学附属第一医院消化内科、重庆医科大学附属第一医院消化内科、美国芝加哥大学医学中心分子肿瘤实验室、重庆医科大学附属第一医院消化内科 |
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