《表1 PCR引物序列：犬Mnx1基因过表达载体的构建及其对脂肪间充质干细胞向胰岛β细胞分化的影响》

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《犬Mnx1基因过表达载体的构建及其对脂肪间充质干细胞向胰岛β细胞分化的影响》

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F：上游引物；R：下游引物。引物中小写部分即为重叠区域。Pdx1：胰十二指肠同源盒1基因；Ngn3：神经元素3；Mafa：肌腱膜纤维肉瘤癌基因同源物A；Nkx2.2:NK2转录因子相关位点2；Nkx6.1:NK6转录因子相关位点1；Neurod1：神经分化因子1；Pax4：成对合基因4；Gata4:GATA结合蛋白4；Pcsk1

试验共设计3个处理组，pAd-Mnx1组、pAdEGFP组和无腺病毒感染的犬脂肪间充质干细胞为阴性对照组。将P4代犬ADSCs以2×105/孔铺至6孔培养板中，当细胞汇合达到70%～80%时，p Ad-Mnx1和p Ad-EGFP组按照MOI=100感染犬ADSCs，荧光显微镜下观察绿色荧光数量与犬AD-SCs的形态变化。分别于感染后第3、6、9、12和15天提取细胞总RNA，q RT-PCR检测Pdx1、Ngn3、Mafa、Nkx2.2、Nkx6.1、Neurod1、Pax4、Gata4、Pcsk1、Pcsk2、Insm1、Insulin基因的相对表达量，GAPDH为内参基因，引物见表1，检测方法同1.4。