《表1 PCR引物序列:大鼠β-arrestin2基因过表达慢病毒载体的构建与鉴定》

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《大鼠β-arrestin2基因过表达慢病毒载体的构建与鉴定》


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根据Pubmed数据库中大鼠Arrb2(β-arrestin2,NM-012911)的cDNA序列,引物由上海捷瑞生物设计合成,予以PCR,得到目的基因(表1)。PCR反应体系配制:ddH2O、5×PS Buffer和dNTP Mix分别为32.5、10.0和4.0μL、10μmol/L上游和下流扩增引物均为1μL、10 mg/L模板和PrimeStar HS DNA polymerase分别1.0和0.5μL;PCR反应条件确定为98℃预变性5 min、98℃变性10 s、55℃退火10 s及72℃延伸90 s,合计30个循环,72℃延伸8 min;琼脂糖凝胶电泳鉴定所得到的PCR产物,再予以回收和纯化。