《表1 PCR引物序列:二陈汤加味对慢性阻塞性肺疾病大鼠β_2AR/β-arrestin2信号通路的影响》

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《二陈汤加味对慢性阻塞性肺疾病大鼠β_2AR/β-arrestin2信号通路的影响》


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制备10%的肺匀浆液,3 000 r·min-1,4℃离心5 min后取上清液,于无菌离心管中-80℃冰箱保存。取新鲜冰冻组织,质量约为100 mg,加入trizol1 m L,用匀浆器研磨成浆,移至无RNase的1.5 m L离心管中,裂解10 min。提取总RNA。用逆转录试剂盒将其逆转录为cDNA,逆转录反应条件为25℃5 min,50℃15 min,85℃5 min,4℃10 min。并用实时荧光定量PCR仪运行PCR扩增,扩增条件为50℃2 min,95℃10 min;95℃30 s,60℃30 s,40个循环。绘制熔解曲线,最终数据以公式2-ΔΔCt进行分析。引物序列见表1。