《表1 PCR引物序列:二陈汤加味对慢性阻塞性肺疾病大鼠TLR4/MyD88/NF-κB信号通路的影响》

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《二陈汤加味对慢性阻塞性肺疾病大鼠TLR4/MyD88/NF-κB信号通路的影响》


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二陈汤加味方药组成:姜半夏10 g,陈皮10 g,苦杏仁10 g,蜜麻黄6 g,茯苓10 g,白术10 g,党参10 g,葶苈子10 g,地龙10 g,山药10 g,甘草片5 g均为华润三九医药生产的中药配方颗粒,批号分别为1509001H,1502001H,1504002S,1503125S,1505002W,1507001W,1507007W,1508001S,1503001S,1510007H,1502001S。LPS和RIPA组织/细胞裂解液(北京索莱宝科技有限公司,批号分别为701C036,20160928);EVP4593(NF-κB抑制剂,美国Selleck公司,批号S490203);大鼠HMGB1(武汉伊莱瑞特生物科技有限公司,批号E-EL-H1554c);大鼠CXCL-2和CXCL-3试剂盒(武汉博士德生物工程有限公司,批号分别为3771190428,3771190429);MCP-1大鼠酶联免疫吸附测定(ELISA)试剂盒(南京森贝伽生物科技公司,批号20170708);总RNA提取试剂盒(南京诺唯赞生物科技有限公司,批号086001);cDNA反转录试剂盒,苏木素染液(美国Sigma公司,批号分别为0000123564,H9627);伊红染液(国药集团化学试剂有限公司,批号71014544);SYBRPremix Ex TaqTMⅡ试剂盒(日本Takara公司,批号AKA403);小鼠抗大鼠TLR4一抗(美国Santa Cruz公司,批号#J1016);辣根过氧化酶标记山羊抗鼠免疫球蛋白(Ig)G(H+L),兔抗大鼠甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)一抗(美国Immuno Way公司,批号分别为B0101,B4501);兔抗大鼠MyD88一抗(美国Abcom公司,批号GR-193027-2);兔抗大鼠NF-κB p65一抗,兔抗大鼠磷酸化(p)-NF-κB p65一抗(美国CST公司,批号分别为8242S,3033S);辣根过氧化物标记羊抗兔免疫球蛋白(Ig)G(北京Trans Gen Biotech公司,批号K31105);DAB显色试剂盒(北京Solarbio有限公司,批号20170628);ECL超敏发光液试剂盒(北京普利来基因技术有限公司,批号ZD310-6AC04D);其他试剂均有河南中医药大学科研实验中心提供;TLR4,MyD88,NF-κB p65,GAPDH的PCR引物均由宝日医生物技术(北京)有限公司设计合成,引物序列见表1。