《表1 引物序列表：二陈汤合桃红四物汤对ApoE~(-/-)动脉粥样硬化小鼠主动脉Nox4/NF-κB/HIF-1α信号通路作用研究》

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《二陈汤合桃红四物汤对ApoE~(-/-)动脉粥样硬化小鼠主动脉Nox4/NF-κB/HIF-1α信号通路作用研究》

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采用RT-PCR法检测各组小鼠主动脉相关基因mRNA表达水平，取100mg主动脉组织置于研钵中，加入液氮研磨后进行水相分离，加入1mL Trizol，转移至1.5mL EP管中，加入氯仿0.2mL，13 500r/min离心15min后吸取上层水相，加入等量异丙醇混合沉淀RNA，13 500r/min离心10min，缓慢加入75%乙醇洗涤，13 500r/min离心10min，空气风干后加入无RNA酶水溶解。紫外吸收测定法测得260nm和280nmOD值，计算RNA浓度和纯度。逆转录成c DNA模板，采用SYBR Green进行实时荧光PCR（基因及引物序列见表1），反应参数为95℃30s，1个循环；95℃5s，55℃10s，40个循环反应。实验重复3次，采用2-ΔΔCt方法进行数据分析。