《表2 PCR引物序列：Wnt/β-catenin信号通路与自噬在骨关节炎软骨细胞中的相互作用》

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《Wnt/β-catenin信号通路与自噬在骨关节炎软骨细胞中的相互作用》

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用Trizol提取SW1353细胞中总RNA。取5μL的RNA用1%琼脂糖凝胶进行电泳，以检测RNA的完整性。用TIANScript RT KIT进行反转录，实验操作按产品说明书进行。因为在炎症细胞中被激活的Wnt通路将导致高表达基质金属蛋白酶（MMPs）和含血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶（ADAMTS），使细胞外基质降解，同时高表达胶原蛋白X导致软骨细胞肥大，从而使关节软骨难以保持永久而稳定的特性[10]。故本次实验将着重对其中MMP13、ADMAMTS5、CCL5、COX-2蛋白的表达量进行研究，以展示自噬对炎症所导致的代谢废物的清除作用。序列设计见表2。对目标基因的扩增按产品说明书进行，完成检测后导出原始数据。根据RT-PCR原始检测结果，按照2-△△Ct相对定量计算公式，计算出各样品的目的基因相对定量结果。